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        25.0生物安全柜的检测内容和方法

        点击次数:985 发布时间:2013-09-27

                                        25.0生物安全柜的检测内容和方法

        在安装时以及以后每隔一定时间,要由有资质的人员按照规定对每一台生物安全柜的整体运行性能进行生物的和物理的认证,以检查其是否符合国家及的性能标准。生物安全柜的检测主要包括物理学检测喝生物学检测两个方面,其中:
          
          安全柜防护效果的物理学评估应该包括:
          
          ①.安全柜的整体、HEPA过滤器的泄漏,
          
          ②.空气向下流动的速率、空气的速率,
          
          ③.负压/换气次数,
          
          ④.气流的稳定性(烟雾特征),
          
          ⑤.以及警报和自控(互锁)系统.
          
          ⑥.漏电
          
          ⑦.照度
          
          ⑧.紫外线强度
          
          ⑨.噪声
          
          ⑩.震动性的测试。
          
          生物学评估包括:
          
          ①.对个体保护效果
          
          ②.对环境保护效果
          
          ③.样品保护试验
          
          ④.交叉污染试验。
          
          4.1下列情况之一时,必须对生物安全柜进行现场检测
          
          1)实验室施工,生物安全柜搬到位置后。
          
          2)生物安全柜移动位置时。
          
          3)生物安全柜进行检修后。
          
          4)生物安全柜更换过滤器后。
          
          5)生物安全柜的一年一度的常规检测。
          
          4.2I生物安全柜的检测
          
          4.2.1密闭性检测
          
          4.2.2排风滤器的检测
          
          1)HEPA滤器泄漏检测,安全柜在正常的使用条件下用方法进行。
          
          2)多分散DOP或相当的气溶胶通过率不大于0.01%。
          
          4.3II级生物安全柜检测
          
          4.3.1原则
          
          的II级安全柜必须符合生产国相应标准,如:美国、加拿大标准NSF49,英准BS5726,德准DIN12950-10,法准NFX44201,澳大利亚标准AS2252.2等。
          
          国产的II级生物安全柜生产必须制定相应的企业标准,其性能指标不低于同类产品标准。出厂时必须按企业标准对每台生物安全柜进行检测并出具检测报告,使用微生物进行的生物安全防护检测不得省略。对于每个产品应产品性能数据单。质量控制试验应包括:
          
          4.3.2烟雾试验:
          
          用发烟器械发烟,对烟的流动作直观判断。
          
          1)在工作面中线上方高于工作窗口上沿15cm处,从一端到另一端发烟,烟的流动应为向下垂直流线,无逆流,不得有死角和回流,也无烟雾从安全柜溢出。
          
          2)距工作窗口0.04m沿窗口外沿同样发烟,烟流向柜内流动无溢出,工作表面无烟雾。
          
          3)如为推拉式工作窗口,沿工作窗口的外周边发烟,烟流向内,无逆流无溢出,工作面无烟雾。
          
          4.3.3气流速度测定
          
          4.3.3.1垂直送风气流速度测定
          
          1)仪器:度为读数±3%的风速仪(alno8500型热球)。
          
          2)方法:柜内送风口下方的15m处,均匀布点。测点间距不大于12cm.测点布置不少于3行,靠内壁的那行距内壁15cm,每行数不少于7个测点。
          
          3判定:垂直气流均匀区所测平均风速是0.38m/s±0.025m/s,单点风速与所测平均风速之差不大于20%为合格。
          
          4.3.3.2正面窗口进风的风速测定
          
          用计算方法或实测方法测出的风速。
          
          所测量或计算的进风的风速与生产给定值之差小于0.025m/s为合格。
          
          A1型为0.38m/s±0.025m/s.工作表面每0.3m宽,每秒的小气流量应是0.002m3.
          
          A2型为0.5m/s±0.025m/s.工作表面每0.3m宽,每秒的小气流量应是0.03m3.
          
          B1和B2型为0.5m/s±0.025m/s.工作表面每0.3m宽,每秒的小气流量应是0.03m3.
          
          4.3.4过滤器检漏试验
          
          4.3.4.1送风垂直HEPA和过滤器室和框架泄露试验
          
          1)送气HEPA的密闭周围、滤器室和滤器介质要用激光粒子计数器扫描法检测。无漏点,透过率不可过0.01%或洁净度达到100级.
          
          2)用琼脂平皿沉积法检测,洁净度达到100级为合格。
          
          4.3.4.2排风HEPA及过滤器室和框架泄露试验
          
          4.3.4.2安全泄漏试验
          
          打气检漏试验前使生物安全柜处于全关闭状态,即将风管和工作窗口关闭(可用密封胶带密封)。静态(断电)时对生物安全柜内部充气加压至500Pa,观察压力保持情况。压力30分钟下降小于10%为合格。或者作肥皂泡试验无漏点。
          
          4.3.4.3排风HEPE检漏和透过率试验
          
          1)用激光粒子计数器,对排风的HEPE及其附属的滤器室和支架等进行检漏和透过率检测,没有漏点,0.3≧μm粒子的透过率<0.01%为合格。
          
          2)生物气溶胶检测用间接喷雾器把1-8×10-8浓度的悬液枯草芽胞或黏质沙雷氏菌发生气溶胶,在安全柜正常工作情况下于HEPA上游攻击,用2级安德森生物气溶胶采样器进行常规采样,上游采样浓度>300pfu/m3,在下游采样结果阴性或不过1pfu/m3为合格。
          
          4.3.5产品、个人、环境保护和交叉污染的生物试验
          
          必须用生物气溶胶考验安全柜的防护性能,包括下述内容。
          
          4.3.5.1个人保护试验
          
          1)一种方法是在规定参数条件下运转中,在工作面中央上方35cm,观察窗的里面10cm的地方,用喷雾器雾化30ml悬液枯草芽胞或黏质沙雷式菌,喷雾方向朝外,悬液细菌的浓度为108个/ml。4个安德森生物气溶胶采样器,布置在开口中央模拟工作的一个圆柱体(轴线距工作面7.0cm,模拟1个手臂)的上下左右,距进入工作开口250Cm.处进行采样,试验进行30分钟,全部采样器采集的细菌不过10个(cfu),试验重复进行3次。柜内对照一个平皿收到300pfu以上。细菌气溶胶粒子中值质量直径应在0.5mm~3.0mm之间。
          
          2)另按一种方法在圆柱体周围放4个AGI,采样入口在安全柜的前面距观察窗6.3cm。其中2个AGI相距15cm,在圆柱体上面水平切面上,另外2个AGI-30相距5cm,在圆柱体下面2.5cm,处。另外2个2级安德森空气微生物采样器放在2侧,进气口水平面上,距离操作口15cm,距离侧壁20cm。2个AGI放在进气口水平工作面上方36cm,安全柜边缘外面5cm处,.每一个距离中心15cm.).
          
          AGI所有的采样液体用47mm,0.22的滤膜过滤,贴在适当的培养基上培养24-28h,如果阴性继续观察到44-48h.
          
          对于新型和重要改进的安全柜,上述试验应在下列条件下进行:在原本进入气流流速减去0.05±0.015m/s,在原本向下气流流速加上和减去0.05±0.015m/s,气流流速用仪器直接测量。每台安全柜都应作气流检测。
          
          在作向下气流调整时要用全部测量的平均速度。
          
          在确定向下和进入气流速度时应避免使用不适合的仪器。对于新的和做了修改设计的产品应对进入和向下气流速度减去0.05±0.015m/sd情况下重复上面的步骤。
          
          合格标准:
          
          每个试验6只AGI收到细菌不过10pfu,2个裂隙采样器30分钟收到的不过5pfu.试验重复3次,对照都应阳性,一个平皿过300个pfu.
          
          4.3.5.2产品保护试验
          
          全部的工作面,放上沉降平皿。喷雾器放在距观察窗底部外沿102mm处,方向朝观察窗,细菌浓度为(1-8)×10-6。一个圆柱体放在喷雾器下面50mm处,模拟1个手臂。试验进行5分钟,柜内沉降平皿收到的菌落数不过5个,试验需重复3次。
          
          4.3.5.3交叉污染试验
          
          柜内全部工作面放上沉降平皿。喷雾器放在距工作面上方76-127mm,以一侧壁为背景向另一侧喷雾,细菌浓度为(1-8)×10-4。试验进行5分钟,结果在过距攻击一侧356mm的平皿中不过2个cfu.2侧攻击均需3次。
          
          4.3.5.4环境保护试验
          
          在上述攻击试验的同时在安全柜排风口用一台2级安德森采样器采样30分钟,收到的试验菌不得过2个cfu。
          
          4.3.6.稳定性试验
          
          对II级生物安全柜应作抗颠倒和扭曲试验
          
          4.3.6.1.抗颠覆按照3101的第七部分执行
          
          4.3.6.2当在接近顶部边缘(反面)横向施以110kg力时,在顶部前沿和侧面顶部向前移位不过1.6mm.
          
          4.3.6.3工作表面抗压力在工作表面中央25×25cm的面积内平均分布23kg重量,工作表面没有偏斜。
          
          4.3.6.4抗偏斜110kg放在柜的边缘处,后面底部抬高不过1.6mm.
          
          4.3.7生产应资料
          
          每一台生物安全柜的说明书中应有产品质量控制数据资料。
          
          1)压力降/肥皂泡/识别气体检漏,
          
          2)个人保护,产品保护检测资料
          
          3)环境保护检测资料
          
          4.4其它检测
          
          1)温升工作4小时柜内温升不过8.50C.
          
          2)光照度柜内平均照度650Lux。个人读(眼)处不低于430Lux.
          
          3)噪音水平在正常工作状态时,工作面上方38cm,,操作口外面30cm处的噪声,(在大背景噪声为57db)不过67db
          
          4)振动在正常设定参数下工作,工作面中央10Hz-10kHz的振动频率的振幅净位移不过2×10-4in(5×10-6m)rms。
          
          5)漏电检测接地电阻和电性试验。
          
          6)水漕漏水试验4升水1小时肉眼看不到漏。
          
          7)风机性能在设定风速在没有调控的情况下,压力降低50%,新滤器进风量减少不过10%。

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